Warning: Declaration of WPRandomPostsWidget::update($new_instance) should be compatible with WP_Widget::update($new_instance, $old_instance) in /home/hydra17/ftp/makabiwarszawa.pl/wp-content/plugins/wp-random-posts/randomposts.php on line 38
Antymitogenne działanie HDL i APOE za pośrednictwem aktywacji IP zależnej od Cox-2 cd – Klinika makabi warszawa

Klinika makabi warszawa

Antymitogenne działanie HDL i APOE za pośrednictwem aktywacji IP zależnej od Cox-2 cd

5 września 2019 by admin

Wejście fazy S komórek transfekowanych (eGFP-dodatnich) określono przez inkorporację BrdU. W przypadku testów zmian ruchliwości elektroforetycznej (EMSA) i testów super-przesunięcia, mysie aorty SMC doprowadzono do 80-90% konfluencji w naczyniach o średnicy 150 mm, pozbawiono surowicy i bezpośrednio stymulowano przez 18 godzin 10% FBS pod nieobecność lub obecność APOA-I lub APOE. Lizaty jądrowe przygotowano i inkubowano ze znakowanymi oligonukleotydami odpowiadającymi miejscu CRE i CCAAT, jak opisano (13). Testy kinazy in vitro. SMC A10 hodowano do 80-90% konfluencji w naczyniach o średnicy 150 mm, pozbawiono surowicy i stymulowano 10% FCS w nieobecności lub obecności 2. M APOE, jak opisano powyżej. Komórki przemyto raz PBS i poddano lizie, jak opisano (22). Ekstrakty z zebranych komórek inkubowano z anty-cykliną E (4 .g / 300 .g lizatu) lub frakcją siarczanu amonu anty-cykliny A (40 .g / 100 .g lizatu). Zebrane immunoprecypitaty podzielono na dwie równe frakcje i użyto do pomiaru aktywności kinazy w kierunku histonu H1 lub tworzenia kompleksu z cdk2 jak opisano (13). 6-keto-prostaglandyna F1. enzymatyczny test immunologiczny. Spoczynkowe WT i SMC o zerowym IP zostały doprowadzone do 80-90% konfluencji w 100-mm naczyniach, pozbawione surowicy i bezpośrednio stymulowane 10% FBS pod nieobecność lub obecność 2. M APOE. Kondycjonowane pożywki (100 ul) zebrano z komórek po 24 lub 48 godzinach. Kondycjonowane pożywki badano następnie na obecność 6-keto-prostaglandyny F1. (6-keto-PGF1a) przy użyciu zestawu do testu immunoenzymatycznego (Cayman Chemical, Ann Arbor, Michigan, USA). Analiza mRNA Cox-2 i białka. Wpływ lipoprotein i apo. Na mRNA Cox-2 i białko określono odpowiednio przez PCR i immunoblotting. Mysie aorty SMC wzrastały do 80-90% konfluencji w naczyniach o średnicy 150 mm, pozbawiono surowicy przez 48 godzin w określonej pożywce (patrz powyżej) i bezpośrednio stymulowano 10% FBS przez 18 godzin. Całkowity RNA izolowano z komórek poddanych lizie w odczynniku Trizol (Invitrogen), a 2 .g z każdej próbki zastosowano do syntezy cDNA z zastosowaniem układu przedwzmacniania Superscript II (Invitrogen). Próbkę (10%) cDNA poddano następnie 35 cyklom PCR, stosując polimerazę Taq DNA, topienie w 94 ° C, hybrydyzację w 55 ° C (1 minuta) i wydłużanie w 72 ° C (1 minuta). Startery były specyficzne dla mysich Cox-1, Cox-2 i GAPDH (23) lub ludzkich Cox-1 (sens: 5 (3-CTGGTGGATGCCTTCTCTCGCC-3 (3 antysensowny: 5 (3-GTCTTGGTGTTGAGGCAGACCAG-3 (3), Cox-2 ( sens: 5. -CAGCAAATCCTTGCTGTTCC-3 (3, antysensowny: 5 (3 -GAGAAGGCTTCCCAGCTTT-3.). Amplifikowane produkty analizowano za pomocą elektroforezy w żelu agarozowym i barwienia bromkiem etydyny, a zmiany w ilości oznaczano ilościowo przy użyciu oprogramowania NIH Image 1.63. Lizaty aortalnych SMC także analizowano przez immunoblotting dla białka Cox-2, jak opisano powyżej. Stymulacja in vivo mRNA Cox-2 przez ekspresję APOE. W celu ekspresji APOE in vivo zastosowano rekombinowany adenowirus drugiej generacji, kodujący cDNA ludzkiego APOE3 (AdAPOE3), jak opisano wcześniej (24). W sumie 12, 6- do 8-tygodniowych samic myszy WT C57BL / 6 (cztery na grupę) wstrzyknięto do żyły ogonowej 1011 cząsteczek AdAPOE3, wirusa AdapOA-I drugiej generacji lub kontrolnego wirus (Adnull). Myszy uśmiercono 3 dni po wstrzyknięciu i perfundowano z lodowatym PBS, i zebrano całą aortę. Nasze poprzednie badania wykazały, że białka ulegające ekspresji adenowirusa gromadzą się w ścianie naczynia (25). Rozcięto części aorty i pobrano starannie tkankę obcą od strony przydanki. Tkankę następnie natychmiast zanurzono w RNAlater (QIAGEN Inc., Valencia, California, USA) i ręcznie homogenizowano. Homogenat potraktowano proteinazą K (55 ° C, 10 minut, QIAGEN Inc.) i sklarowano przez odwirowanie (30 minut, 10 000 g, 20. 25 ° C). Supernatant zmieszano z 0,5 objętościami etanolu i oczyszczono na kolumnie RNeasy mini (QIAGEN Inc.). Całkowity RNA (2 ug) poddano odwrotnej transkrypcji z zastosowaniem układu do przedwzmacniania Superscript II. Próbkę (40%) cDNA analizowano metodą PCR, jak opisano powyżej. Procedury dotyczące myszy zostały zatwierdzone przez University of Pennsylvania i Wistar Institutional Animal Care and Use Committees. Wyniki HDL i APOE hamują wejście fazy S do aortalnych SMC. Początkowo porównaliśmy wpływ HDL i LDL na wchodzenie w fazę S wczesnych pasaży aorty SMC. SMC aorty były głodzone w surowicy i stymulowane surowicą w podkonfliktach w obecności BrdU; komórki te wykazywały zależny od czasu wzrost do fazy S podczas 48 godzin stymulacji surowicy. LDL miał znikomy wpływ na kinetykę wejścia fazy S, ale HDL hamował wejście fazy S o więcej niż 50% (Figura 1a). Co więcej, antymitogenny efekt HDL został utracony, gdy APOE został zubożony w lipoproteinę (rysunek 1a)
[patrz też: karpacz informacja turystyczna, stargard szczeciński szpital, szpital lublin jaczewskiego ]
[przypisy: szpital lublin jaczewskiego, dieta paleo jadłospis na tydzień, szczepienie dur brzuszny ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: dieta paleo jadłospis na tydzień, szczepienie dur brzuszny, szpital lublin jaczewskiego

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

CX3CR1 reguluje homeostazę makrofagów jelitowych, translokację bakteryjną i odpowiedzi kolektywne Th17 u myszy ad 8

Martwe komórki zidentyfikowano przy użyciu utrwalanego zestawu Aqua Dead Cell Staining Kit (Invitrogen). Rekombinowany mysi M-CSF pochodził od Peprotech. Siarczan dekstranu sodu (masa cząsteczkowa, 40. 50 kDa) pochodził z firmy USB Corp. Isolation of LP cells.

Niezależne od ciśnienia wzmocnienie przerostu serca u myszy z niedoborem receptora natriuretycznego A ad 5

Bloker a-adrenergiczny, propranolol (0,08 lub 0,16 g / l) obniża wartość BP w Npr1 (3). myszy o około 3 mmHg (NS), chociaż częstość akcji serca u tych myszy zmniejszyła się o około 10%, co wskazuje na prawidłowe podawanie. Najniższa badana dawka każdego leku, która zmniejszyła BP Npr1. /. Myszy lub mniej niż myszy Npr1 + ... [Read more...]

Połączenie stymulacji a-1-adrenergicznej z apoptotyczną śmiercią komórek serca poprzez niezależną aktywację kinazy białkowej Ca2 + / kalmoduliny kinazy II

Stymulacja receptora. 1-adrenergicznego (. 1AR) aktywuje klasyczną szlak kinazy cAMP / białka A (PKA) do regulowania ważnych procesów komórkowych od zmiany ekspresji genów do kontroli metabolizmu, skurczu mięśni i apoptozy komórkowej. Tutaj pokazujemy, że przedłużona stymulacja a1AR promuje apoptozę miocytów sercowych przez aktywację kinazy Ca2 + / kalmoduliny II (CaMKII), niezależnie od sygnalizacji PKA. Apoptoza ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

http://www.astra-dent.pl/leczenie-kanalowe-katowice.php

Tags

bakteryjne zapalenie pochwy leki choroba dwubiegunowa przyczyny dieta paleo jadłospis na tydzień etnoliga football trening ile kcal ma bułka grahamka karpacz informacja turystyczna leclerc szczecin godziny otwarcia luxmed lublin odbiór wyników makabi makabi warszawa najlepszy prezent dla kobiety nietrzymanie moczu zabieg proces pielęgnowania pacjenta z nadciśnieniem tętniczym program promocji zdrowia rezonans magnetyczny otwarty warszawa rezonans magnetyczny przeciwwskazania stargard szczeciński szpital szczepienie dur brzuszny szpital lublin jaczewskiego tomografia komputerowa cennik witaminy dla nastolatków

Copyright © 2021 Klinika makabi warszawa.