HDL i związane z nim apo, APOE, hamują wejście do fazy S mysich komórek mięśni gładkich aorty. Podaje się tutaj, że antymitogenny wpływ mapy APOE na N-końcową domenę wiążącą receptor ., że APOE i jego N-końcowa domena hamują aktywację promotora cykliny A i że te efekty obejmują zarówno zależne od niezależnych, jak i niezależne szlaki białka kieszeni. Te działania antymitogenne bardzo przypominają te obserwowane w odpowiedzi na aktywację IP receptora prostacykliny. Rzeczywiście, stwierdziliśmy, że HDL i APOE hamują progresję cyklu komórkowego mięśni gładkich aorty, stymulując ekspresję Cox-2, prowadząc do syntezy prostacykliny i zależnego od IP hamowania genu cykliny A. Podobne wyniki wykryto w ludzkich komórkach mięśni gładkich aorty i in vivo przy użyciu myszy z nadekspresją APOE. Nasze wyniki identyfikują gen Cox-2 jako cel sygnalizacji APOE, związek HDL i działanie APOE z IP oraz opisują potencjalną nową podstawę kardioprotekcyjnego działania HDL i APOE. Wprowadzenie APOE to białko o masie cząsteczkowej 34 kDa związane z lipoproteinami bogatymi w triglicerydy i HDL. Odgrywa ważną rolę w zapobieganiu chorobie miażdżycowej i jest głównym wyznacznikiem podatności na chorobę wieńcową człowieka (1). APOE składa się z N-końcowej domeny, która zawiera region wiążący receptor LDLa i C-końcową domenę, która ma region wiążący lipidy. Wiele badań wykazało, że APOE hamuje miażdżycę po części poprzez obniżenie poziomu cholesterolu w osoczu poprzez klirens wątrobowy pozostałych lipoprotein i HDL (1) bogatych w cholesterol. Ostatnie doniesienia sugerują jednak, że APOE może również chronić przed miażdżycą tętnic za pomocą mechanizmów niezależnych od jej zdolności do modulowania poziomów lipidów w osoczu (1-5, a niektóre z tych badań pokazują, że APOE hamuje proliferację mięśni gładkich i progresję fazy G1 ( 4, 5). Zhu i in. wykazali, że APOE hamuje proliferację przyśrodkowej komórki mięśni gładkich (SMC) po urazie naczyniowym in vivo (6). Progresja cyklu komórkowego w fazie jest regulowana przez sekwencyjną aktywację kompleksów cykliny G1 i kinaz zależnych od cykliny (cdk), a mianowicie cyklin D1-cdk4 i cykliny E-cdk2. Aktywne kompleksy cykliny D1-cdk4 / 6 i cykliny E-cdk2 regulują progresję fazy G1 częściowo przez fosforylację białka siatkówczaka (pRb) i pokrewnych białek kieszeniowych p107 i p130 (7). Fosforylacja białek kieszeniowych przez kompleksy cykliny-cdk fazy G1 prowadzi do transkrypcji genów reagujących na E2F, takich jak cyklina A. E2F4-p107 transkrypcyjnie represjonuje gen cykliny A we wczesnej fazie G1, a E2F1-3 transkrypcyjnie aktywuje gen w G1 / S (8). Inne badania pokazują jednak, że mechanizmy niezależne od białka E2F-pocket są również wymagane do wydajnej indukcji transkrypcji cykliny A; na przykład element odpowiedzi cAMP (CRE) jest niezbędny do wydajnej indukcji genu cykliny A (9, 10). Ostatecznie ekspresja cykliny A i wynikające z niej tworzenie się kompleksów cykliny A-cdk2 oznacza wejście w fazę S cyklu komórkowego. Proliferacja aortalnych SMC odgrywa wyraźną rolę w restenozie, a wiele badań wskazuje, że odgrywa również rolę w przebudowie naczyń i miażdżycy. Prawdopodobne regulatory proliferacji SMC in vivo obejmują TGF-y, prostacyklinę i NO, z których wszystkie są uwalniane z komórek śródbłonka i uważa się, że wywierają działanie antymitogenne na sąsiadujące SMC w normalnym naczyniu (11, 12). Niedawno badaliśmy działanie prostacykliny w cyklu komórkowym we wczesnych pasażach mysich aortalnych SMC i stwierdziliśmy, że hamuje ona progresję do fazy S, blokując zarówno fosforylację kieszonkowych białek, jak i wiązanie białka wiążącego element odpowiedzi cAMP (CREB) / fosfoCREB do promotora cykliny A (13). Zgodnie z oczekiwaniami, w tych działaniach pośredniczył IP, receptor prostacykliny. Ponadto, delecja IP u myszy powoduje zwiększoną odpowiedź proliferacyjną na uszkodzenie (14). W tym badaniu zbadaliśmy mechanizm, dzięki któremu HDL i APOE hamują proliferację SMC aorty. Pokazujemy, że zarówno wejście HDL i blok wejściowy APOE w fazie S, jak i ekspresja genu cykliny A i że powstałe zatrzymanie fazy G1 bardzo przypomina działanie obserwowane po aktywacji IP. Pokazujemy również, że HDL i APOE indukują ekspresję genu Cox-2, że hamujące działanie APOE na wejście fazy S jest odwracane przez specyficzny inhibitor Cox-2 (3 i że IP jest wymagany do antymitogennego działania APOE. Tak więc, antymitogenne działanie HDL i APOE jest pośredniczone przez indukcję syntezy prostacykliny Cox-2 i Cox-2a. Ogólnie rzecz biorąc, wyniki te stanowią nową podstawę do myślenia o kardioochronnym działaniu HDL i APOE. Metody Kultura komórkowa
[więcej w: nietrzymanie moczu zabieg, szczepienie dur brzuszny, stargard szczeciński szpital ]
[przypisy: luxmed lublin odbiór wyników, leclerc szczecin godziny otwarcia, rezonans magnetyczny przeciwwskazania ]
