Podobnie jak w przypadku naszych wyników z L. major, brak drenujących węzłów chłonnych podczas wstępnego podawania do białka OVA praktycznie nie miał wpływu na indukcję eozynofilii BAL lub selektywne wytwarzanie cytokin IL-5 i IL-13 przez OVA-restymulowane płuca komórki. Podsumowując, odkrycia te sugerują, że początkowe interakcje APC / antygen, które występują w tkankach, mogą przyczyniać się do wyniku pierwotnego działania komórek T płucnych. Tabela 1Indranasalne priming do białka OVA można indukować w nieobecności drenujących węzłów chłonnych. Absorpcja Antigen preferencyjnie stymuluje wytwarzanie IL-10 i IL-6 przez rezydentne płucne APC. Aby poruszyć kwestię, w jaki sposób miejscowe APC płuc mogą przyczynić się do różnicowania Th2 w obrębie układu płucnego, zbadaliśmy następnie profil cytokin wytwarzanych przez te APC po pobraniu antygenu in situ. Myszy otrzymały donosowe dostarczenie L. major jako immunogenu (lub samego PBS), a 18 godzin później przygotowano zawiesiny komórek tkanki płucnej i wzbogacone w CD11 APC wzbogacone do ponad 85% z zastosowaniem protokołu adherencyjnego. Całkowity RNA ekstrahowano z tych wzbogaconych APC i analizowano pod kątem ekspresji mRNA cytokiny za pomocą testu ochrony przed RNazą. Najbardziej uderzającą cechą danych była bardzo znaczna regulacja w górę mRNA IL-10 i IL-6 po wychwyceniu antygenu (Figura 6a). Co ważne, obie te cytokiny są związane z promowaniem różnicowania komórek Th2, chociaż mechanizm może polegać na hamowaniu odpowiedzi Th1 (15, 16). Zgodnie z oczekiwaniami, donosowe dostarczanie LPS z L. major indukowało zasadniczą regulację w górę zarówno mRNA IL-12p35, jak i IL-12p40; jednak poziomy IL-10 i IL-6 były praktycznie niezmienione. W rzeczywistości, gdy badaliśmy typ różnicowania komórek T indukowany przez myszy, które otrzymały kodowanie L. major i LPS (Figura 6b), obserwowaliśmy spadek wszystkich cytokin typu Th2, ale tylko niewielki wzrost IFN – ., co sugeruje mieszaną (Th0) odpowiedź, a nie przejście na Th1. Podsumowując, dane te sugerują, że w przypadku braku silnego sygnału prozapalnego, APC w mikrośrodowisku płucnym mogą wykazywać wrodzoną tendencję do generowania cytokin stymulujących Th2, co z kolei tłumaczy przewagę w odpowiedziach efektorowych Th2 często obserwowanych w obrębie płucnego układu oddechowego. traktat. Ponadto odkrycia te dostarczają dalszych dowodów na to, że zdarzenia w lokalnym środowisku tkankowym prawdopodobnie odegrają ważną rolę podczas stymulacji i różnicowania komórek T płucnych. Ryc. 6 Pobieranie wlotu w płucu sprzyja ekspresji IL-10 i IL-6 przez rezydentne komórki APC. (a) Myszom podano donosowe PBS 107L. major (Ag) lub 107L. główny plus 0,4 .g LPS (LPS + Ag), a 18 godzin później ich płuca zostały wyizolowane w celu wytworzenia zawiesin komórek. Płucne CD11cbright APC zostały wzbogacone o przyleganie i poddane lizie, a RNA zostało wyekstrahowane. Aktywowane komórki dendrytyczne (DC) wytworzono z komórek szpiku kostnego hodowanych w obecności rGM-CSF, a następnie stymulowano .g / ml LPS. Pięć mikrogramów z każdej próbki RNA analizowano za pomocą testu ochrony przed RNazą za pomocą zestawu do zwielokrotniania RiboQuant. Chronione fragmenty rozdzielono na 5% denaturującym żelu poliakrylamidowym i wizualizowano metodą autoradiografii. Rysunek pokazuje poziomy transkryptu wskazanych cytokin po 16-godzinnej ekspozycji. Dane GAPDH pochodzą z 2-godzinnej ekspozycji. (b) Grupom (n = 4) myszy C57BL / 6 podano donosowe podanie L. pasożytów, z lub bez 0,4 .g LPS, i poddano prowokacji 7 dni później drugą donosową dawką pasożytów (bez LPS) do wywoływać odpowiedzi efektorowe. Cztery dni po prowokacji myszy uśmiercano, a ich komórki tkanki płucnej łączono w pulę dla każdej grupy i przygotowywano do hodowli z różnymi dawkami L. major. Rozpuszczalnego lizatu i splenicznych APC śledzionowego typu dzikiego do indukowania produkcji cytokin specyficznych wobec antygenu. Wykresy słupkowe pokazują średnią produkcję IFN-a, IL-5 i IL-13 po 4 dniach hodowli. Dyskusja Celem obecnych badań było zbadanie wczesnych zdarzeń immunologicznych po donosowym dostarczeniu dwóch różnych immunogenów, o których wcześniej wykazano, że indukują selektywne primowanie Th2 w przewodzie płucnym, w celu ustalenia, w jaki sposób wychwyt antygenu może wpływać na APC, a z kolei wpływa na pobudzanie limfocytów T w obrębie mikrośrodowiska płuc. Stwierdziliśmy, że populacja populacji komórek CD11 jasnych była głównymi komórkami APC, które obciążały się antygenem w płucu po podaniu donosowym, i że ta populacja była fenotypowo najbardziej analogiczna do niedojrzałej części komórek dendrytycznych, bez wyraźnej segregacji w mieloidę lub linia limfatyczna komórek dendrytycznych
[przypisy: witaminy dla nastolatków, proces pielęgnowania pacjenta z nadciśnieniem tętniczym, nietrzymanie moczu zabieg ]
[hasła pokrewne: etnoliga, football trening, program promocji zdrowia ]
