Ekspresję RNA SGCG wykryto w przeprogramowanych przez MyoD fibroblastach zarówno z kontroli jak i pacjenta LGMD 2C (ex6del). Stopień ekspresji RNA SGCG był jakościowo mniejszy w przypadku ex6del, zgodnie z obecnością pojedynczego funkcjonalnego allelu SGCG i / lub rozpadu z udziałem nonsensu. Figura 7A-mediowana korekcja ramki odczytu w ludzkich zmutowanych komórkach SGCG. (A) Pokazano 2 … [Read more…]
W wyniku wnikliwej inspekcji zmniejszone wychwytywanie barwnika obserwowano w Sgcg, Tg50 w porównaniu z mięśniami pozbawionymi Sgcg, co zaobserwowano w przeponie i mięśniach brzucha (ryc. 5, A i B). Mikroskopowo, wychwyt barwnika był zmniejszony w mięśniach czworogłowych (Figura 5C). Procent mięśnia przepony zmętnowany przez wychwyt barwnika był zmniejszony w Sgcg, Tg50 w porównaniu z mięsakiem … [Read more…]
Generowano myszy transgeniczne eksprymujące mysią Mini-Gamma pod kontrolą promotora ludzkiego desminy (DES). Dwie niezależne linie Mini-Gamma zostały scharakteryzowane; Tg50 miał wyższą ekspresję, podczas gdy Tg84 miał ekspresję niższego poziomu. (B) Aby ocenić tworzenie kompleksu sarkoglikanu, preparaty mikrosomalne oczyszczono z transgenicznego mysiego mięśnia. Wyizolowano mikrosomy związane z błoną. Wiadomo, że kompleks sarkoglikanu wzbogaca ciężką frakcję mikrosomalną … [Read more…]
Poprzednio wykazano, że P- i P-sarkoglikan tworzą podjednostkę rdzeniową, a następnie dodano do kompleksu .-cyganoglikan. Ekspresja poszczególnych podjednostek sarkoglikanu. . -,. – lub.
Aby przetestować funkcjonalność Mini-Gamma, wykorzystano system GAL4 / UAS do ekspresji mysiego Mini-Gamma w uprzednio ustalonym modelu dystrofii mięśniowej Drosophila (17, 18). Drosophila ma pojedynczy (3 / a-sarkoglikanowy ortolog, który jest równie powiązany z s-ai-sarkoglikanem (35% identyczny, 56% podobny do każdego). Muchy Sgcd840 mają dużą delecję genu Sgcd Drosophila, a muchy Sgcd840 rozwijają upośledzoną ruchliwość … [Read more…]
Pominięcie eksonu wykorzystuje antysensowne oligonukleotydy jako leczenie chorób genetycznych. Antysensowne oligonukleotydy stosowane do pomijania egzonu są zaprojektowane do ominięcia przedwczesnych kodonów stop w docelowym RNA i przywrócenia przerwania ramki odczytu. Pomijanie egzonu jest obecnie testowane na ludziach z mutacjami genu dystrofiny, którzy mają dystrofię mięśni Duchenne a. W przypadku dystrofii mięśniowej Duchenne a uzasadnienie pominięcia … [Read more…]
Hipotezę tę potwierdza fakt, że aktywne formy małych białek wiążących GTP, Rho, Cdc42 i Rac, które są substratami dla toksyny A, są zaangażowane w aktywację transkrypcji zapalnych cytokinowych genów. Na przykład wykazano, że Cdc42 i Rac regulują p38 i JNK, podczas gdy Rho, Cdc42 i Rac są zaangażowane w aktywację NF-kB. Dominujące negatywne mutanty białek … [Read more…]
To rekombinowane białko było również słabo rozpuszczalne w PBS. Hamowanie p38 zapobiega indukowanej przez toksynę A (3 naciekowi neutrofili i zapaleniu jelit u myszy. Aktywacja kinazy p38 MAP toksyny wywołanej przez toksynę C. difficile jest wymagana do wytwarzania IL-8, martwicy i IL-1 (3. uwalnianie przez monocyty in vitro.
Następnie do pożywki dodano toksynę C. difficile A (40 nM) lub a-toksynę S. aureus, toksynę tworzącą pory (10 nM), i monocyty inkubowano przez dodatkowe 90. 120 minut aż do ponad 90 % monocytów było nekrotycznych w grupie kontrolnej. (a) Jak zaobserwowano w mikroskopii z kontrastem fazowym (x 320), obie toksyny wywoływały cechy morfologiczne charakteryzujące nekrozę, … [Read more…]
Komórki THP-1 stymulowano toksyną A (100 nM) przez różne okresy czasu. Aktywności ERK 1/2 (a), p38 (b) i JNK1 (c) zmierzono metodą immunoblottingu z użyciem przeciwciał fosfospecyficznych (górne panele). Aktywności enzymatyczne ERK2, p38 i JNK1 mierzono testami kinazy in vitro po immunoprecypitacji (dolne panele). Mielinowe białko podstawowe (MBP) zastosowano jako substrat dla ERK2 i p38, … [Read more…]