Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu ad 6

EkspresjÄ™ RNA SGCG wykryto w przeprogramowanych przez MyoD fibroblastach zarówno z kontroli jak i pacjenta LGMD 2C (ex6del). StopieÅ„ ekspresji RNA SGCG byÅ‚ jakoÅ›ciowo mniejszy w przypadku ex6del, zgodnie z obecnoÅ›ciÄ… pojedynczego funkcjonalnego allelu SGCG i / lub rozpadu z udziaÅ‚em nonsensu. Figura 7A-mediowana korekcja ramki odczytu w ludzkich zmutowanych komórkach SGCG. (A) Pokazano 2 … [Read more…]

Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu ad 5

W wyniku wnikliwej inspekcji zmniejszone wychwytywanie barwnika obserwowano w Sgcg, Tg50 w porównaniu z mięśniami pozbawionymi Sgcg, co zaobserwowano w przeponie i mięśniach brzucha (ryc. 5, A i B). Mikroskopowo, wychwyt barwnika byÅ‚ zmniejszony w mięśniach czworogÅ‚owych (Figura 5C). Procent mięśnia przepony zmÄ™tnowany przez wychwyt barwnika byÅ‚ zmniejszony w Sgcg, Tg50 w porównaniu z miÄ™sakiem … [Read more…]

Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu czesc 4

Generowano myszy transgeniczne eksprymujÄ…ce mysiÄ… Mini-Gamma pod kontrolÄ… promotora ludzkiego desminy (DES). Dwie niezależne linie Mini-Gamma zostaÅ‚y scharakteryzowane; Tg50 miaÅ‚ wyższÄ… ekspresjÄ™, podczas gdy Tg84 miaÅ‚ ekspresjÄ™ niższego poziomu. (B) Aby ocenić tworzenie kompleksu sarkoglikanu, preparaty mikrosomalne oczyszczono z transgenicznego mysiego mięśnia. Wyizolowano mikrosomy zwiÄ…zane z bÅ‚onÄ…. Wiadomo, że kompleks sarkoglikanu wzbogaca ciężkÄ… frakcjÄ™ mikrosomalnÄ… … [Read more…]

Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu ad

Aby przetestować funkcjonalność Mini-Gamma, wykorzystano system GAL4 / UAS do ekspresji mysiego Mini-Gamma w uprzednio ustalonym modelu dystrofii mięśniowej Drosophila (17, 18). Drosophila ma pojedynczy (3 / a-sarkoglikanowy ortolog, który jest równie powiÄ…zany z s-ai-sarkoglikanem (35% identyczny, 56% podobny do każdego). Muchy Sgcd840 majÄ… dużą delecjÄ™ genu Sgcd Drosophila, a muchy Sgcd840 rozwijajÄ… upoÅ›ledzonÄ… ruchliwość … [Read more…]

Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu

PominiÄ™cie eksonu wykorzystuje antysensowne oligonukleotydy jako leczenie chorób genetycznych. Antysensowne oligonukleotydy stosowane do pomijania egzonu sÄ… zaprojektowane do ominiÄ™cia przedwczesnych kodonów stop w docelowym RNA i przywrócenia przerwania ramki odczytu. Pomijanie egzonu jest obecnie testowane na ludziach z mutacjami genu dystrofiny, którzy majÄ… dystrofiÄ™ mięśni Duchenne a. W przypadku dystrofii mięśniowej Duchenne a uzasadnienie pominiÄ™cia … [Read more…]

Aktywacja kinazy MAP p38 przez toksynę Clostridium difficile A pośredniczy w martwicy monocytów, wytwarzaniu IL-8 i zapaleniu jelit ad 8

HipotezÄ™ tÄ™ potwierdza fakt, że aktywne formy maÅ‚ych biaÅ‚ek wiążących GTP, Rho, Cdc42 i Rac, które sÄ… substratami dla toksyny A, sÄ… zaangażowane w aktywacjÄ™ transkrypcji zapalnych cytokinowych genów. Na przykÅ‚ad wykazano, że Cdc42 i Rac regulujÄ… p38 i JNK, podczas gdy Rho, Cdc42 i Rac sÄ… zaangażowane w aktywacjÄ™ NF-kB. DominujÄ…ce negatywne mutanty biaÅ‚ek … [Read more…]

Aktywacja kinazy MAP p38 przez toksynę Clostridium difficile A pośredniczy w martwicy monocytów, wytwarzaniu IL-8 i zapaleniu jelit ad 7

To rekombinowane białko było również słabo rozpuszczalne w PBS. Hamowanie p38 zapobiega indukowanej przez toksynę A (3 naciekowi neutrofili i zapaleniu jelit u myszy. Aktywacja kinazy p38 MAP toksyny wywołanej przez toksynę C. difficile jest wymagana do wytwarzania IL-8, martwicy i IL-1 (3. uwalnianie przez monocyty in vitro.

Aktywacja kinazy MAP p38 przez toksynę Clostridium difficile A pośredniczy w martwicy monocytów, wytwarzaniu IL-8 i zapaleniu jelit ad 6

NastÄ™pnie do pożywki dodano toksynÄ™ C. difficile A (40 nM) lub a-toksynÄ™ S. aureus, toksynÄ™ tworzÄ…cÄ… pory (10 nM), i monocyty inkubowano przez dodatkowe 90. 120 minut aż do ponad 90 % monocytów byÅ‚o nekrotycznych w grupie kontrolnej. (a) Jak zaobserwowano w mikroskopii z kontrastem fazowym (x 320), obie toksyny wywoÅ‚ywaÅ‚y cechy morfologiczne charakteryzujÄ…ce nekrozÄ™, … [Read more…]

Aktywacja kinazy MAP p38 przez toksynę Clostridium difficile A pośredniczy w martwicy monocytów, wytwarzaniu IL-8 i zapaleniu jelit czesc 4

Komórki THP-1 stymulowano toksynÄ… A (100 nM) przez różne okresy czasu. AktywnoÅ›ci ERK 1/2 (a), p38 (b) i JNK1 (c) zmierzono metodÄ… immunoblottingu z użyciem przeciwciaÅ‚ fosfospecyficznych (górne panele). AktywnoÅ›ci enzymatyczne ERK2, p38 i JNK1 mierzono testami kinazy in vitro po immunoprecypitacji (dolne panele). Mielinowe biaÅ‚ko podstawowe (MBP) zastosowano jako substrat dla ERK2 i p38, … [Read more…]