Klinika makabi warszawa

Połączenie stymulacji a-1-adrenergicznej z apoptotyczną śmiercią komórek serca poprzez niezależną aktywację kinazy białkowej Ca2 + / kalmoduliny kinazy II ad 5

12 września 2019 by admin

Komórki TUNEL-dodatnie zmniejszono z 11,4%. 1,1% do 3,3%. 0,8% według H-89 (n = 4, P <0,01), zgodnie z wcześniejszymi sprawozdaniami (12). Jednak interpretacja eksperymentów z użyciem H-89 jest skomplikowana przez ostatnie odkrycie, że H-89 jest również silnym blokerem AR (24). W związku z tym zahamowaliśmy tę drogę stosując wysoce swoisty, przepuszczalny dla błony inhibitor peptydu PKA, PKI (25) i nieaktywny analog cAMP, Rp-cAMP (26). Wstępne traktowanie miocytów Rp-cAMP (100 .M) lub PKI (5 .M) całkowicie zniosło zależną od PKA fosforylację PLB (Figura 1b), kluczowe docelowe białko docelowe PKA, które reguluje aktywność pompy SR Ca2 + (27), w ten sposób potwierdzając skuteczność tych inhibitorów PKA w zniesieniu sygnalizacji cAMP / PKA. Zaskakująco, żaden inhibitor PKA w tych samych odpowiednich stężeniach nie wywierał istotnego wpływu na apoptozę, w której pośredniczy A (1AR (Figura 1, a i c) e, i Figura 5c). Niezdolność inhibitorów PKA do ochrony miocytów sercowych przed apoptozą indukowaną przez 1AR została potwierdzona w modelu. 2AR KO, w którym gęstość i funkcjonalność natywnych pA1AR pozostają niezmienione (19), a w myotach myszy WT poddanych ISO w obecność blokady. 2AR. Stymulacja natywnego aAR w dorosłych. 2AR KO lub WT miocytach sercowych za pomocą ISO podobnie zwiększonych komórek TUNEL-dodatnich, nawet w obecności PKI lub Rp-cAMP (Figura 2). Tak więc, chociaż uważa się, że szlak sygnałowy cAMP / PKA jest jedynym mechanizmem odpowiadającym na odpowiedzi a-1-adrenergiczne, transdukcja sygnału apoptotycznego AAR zasadniczo omija ten szlak. Rola G. lub sygnalizacja Gi. W celu zidentyfikowania mediatora molekularnego dla apoptotycznego efektu zależnego od PKA-1AR, testowaliśmy kilku kandydatów, w tym wolną G uwalniane z heterotrimerycznych białek Gs lub białek G innych niż Gs (np. białka Gi). Możliwy udział G lub sygnalizację Gi w apoptozie za pośrednictwem AARAR badano przez adenowirusowy transfer genu C-końcowej domeny kinazy. AR (. ARK-ct) w celu zahamowania G sygnalizacja (28) i wstępne traktowanie komórek za pomocą PTX w celu rozbicia sygnalizacji Gi (29). Ani ARK-ct ani PTX nie wpłynęły istotnie na. Apoptotyczne fragmentowanie DNA za pośrednictwem 1AR (Figura 3). Przeciwnie, obydwie interwencje skutecznie blokowały efekt antyapoptotyczny A2AR, w którym pośredniczą G (3 i Gi, w podobnych warunkach eksperymentalnych (5) i zapobiegały aktywacji PI3K za pośrednictwem G3 (30). Te wyniki wykluczają możliwość, że G lub sygnalizacja Gi odpowiada za apoptozę kardiomiocytów za pośrednictwem AARAR. Rysunek 3G lub sygnalizacja Gi nie bierze udziału w apoptozie kardiomiocytów indukowanej przez 1AR. Ani zahamowanie G sygnalizowanie przez adenowirusową ekspresję ARK-ct, ani zakłócanie sygnalizacji Gi przez wstępne traktowanie komórek PTX (1. g / ml przez 3 godziny) spowodowało zmienioną fragmentację DNA indukowaną przez ISO (1. M) oznaczoną testem ELISA śmierci komórek w. 1. 2 komórki DKO zainfekowane AdvarAAR. * P <0,01 vs. miocyty nieleczone ISO. n = 6. 7 niezależnych eksperymentów dla każdej grupy. Istotna rola wejścia Ca2 + i wewnątrzkomórkowego Ca2 + w sygnalizację apoptotyczną a1AR. Wykazano, że zmieniona sygnalizacja Ca2 + sprzyja apoptozie w różnych typach komórek (31). Następnie zbadaliśmy możliwość, że Ca2 +, zamiast cAMP, działa jako drugi przekaźnik, który przekazuje sygnał apoptotyczny AARAR w miocytach sercowych. W miocytach DKO zakażonych Adv-1ARAR, traktowanie ISO przez 3. 6 godzin (tuż przed manifestacją apoptozy indukowanej. 1AR) znacząco podwyższyło wewnątrzkomórkowe wolne Ca2 + mierzone z wrażliwą na Ca2 + sondą fluorescencyjną indo-1. Jak pokazano na Figurze 4a, przedłużona stymulacja a 1AR zwiększyła podstawowy cytozolowy Ca2 + z 122,8. 5,8 (n = 32 komórki z sześciu serc) do 308,7. 9,7 nM (n = 29 komórek z sześciu serc). Ta odpowiedź Ca2 + pozostawała w dużej mierze w stanie nienaruszonym w obecności PKI (5. M), ale została zniesiona przez nifedypinę (1. M), antagonistę kanału Ca2 + typu L, co wskazuje na wzrost wewnątrzkomórkowego Ca2 + za pośrednictwem prądów Ca2 + typu L (ICa) ) (Rysunek 4a). Ponadto, zmierzono wewnątrzcząsteczkowe przejściowe stany Ca2 + w hodowanych, stymulowanych (0,5 Hz) miocytach sercowych w obecności i przy braku przedłużonej stymulacji a1AR według ISO. Stymulacja. 1AR znacząco zwiększała zarówno rozkurczowe, jak i skurczowe Ca2 +, z najbardziej znaczącym efektem rozkurczowym w stymulowanych miocytach sercowych (Figura 4b). Tak więc, stymulacja. 1AR zwiększa cytozolowe Ca2 + zarówno w kurczących się, jak i niesprężających miocytach sercowych. W celu ustalenia, czy zmieniona homeostaza Ca2 + jest przyczynowo związana z apoptozą indukowaną przez AARAR, zahamowaliśmy wejście Ca2 + przez nifedypinę lub buforowany wewnątrzkomórkowy Ca2 + przez inkubowanie komórek z EGTA-AM. Obie terapie uratowały miocyty sercowe przed apoptozą indukowaną przez 1AR (figura 4c). Ponadto, zmierzono obciążenie Ca2 + SR, indeksowane przez amplitudę przejściowych Ca2 + generowanych w odpowiedzi na podanie kofeiny w bolusie (20. M) [hasła pokrewne: luxmed lublin odbiór wyników, rezonans magnetyczny przeciwwskazania, proces pielęgnowania pacjenta z nadciśnieniem tętniczym ] [przypisy: nietrzymanie moczu zabieg, szpital lublin jaczewskiego, dieta paleo jadłospis na tydzień ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: dieta paleo jadłospis na tydzień, nietrzymanie moczu zabieg, szpital lublin jaczewskiego

Partnerzy serwisu:



Zobacz tez:

Mechanizm i profilaktyka ostrego uszkodzenia nerek u nefropatii w modelu gryzonia ad 5

Obecne eksperymenty biochemiczne i in vivo dały zatem dowód na to, że formacja odlewnicza w części środkowej była integralnie zaangażowana w patogenezę AKI z nefropatii odlewniczej. Co więcej, dane sugerują klinicznie ważne i, jak sądzimy, nowe podejście do zarządzania AKI w tym otoczeniu. THP składa się z 5 znanych domen, które zawierają domenę podobną do ... [Read more...]

Skierowanie na zależne od TACE uwalnianie ligandu EGFR w raku piersi ad 8

E-kadheryna (BD Biosciences) była używana jako kontrola obciążenia. Bloty opracowano przy użyciu odczynnika chemiluminescencyjnego SuperSignal West Femto (Pierce Biotechnology). Obrazy zostały wykonane przy użyciu aparatu FluorChem 8900 (Alpha Innotech). ELISA. Równą liczbę komórek przemyto 3 razy i pozostawiono do kondycjonowania środowiska przez 90 minut.

Komórki rezydualne prezentujące antygen płuc mają zdolność do promowania różnicowania komórek T2 in situ czesc 4

RNA wyekstrahowany z aktywowanych komórek dendrytycznych zastosowano jako kontrolę pozytywną do wykrywania mRNA cytokin. Te komórki dendrytyczne wytworzono z komórek szpiku kostnego hodowanych przez 10 dni w obecności 200 U / ml rGM-CSF, a następnie przez nocną stymulację .g / ml LPS. Wyniki Donosowe podanie immunoglobuliny typu Th1 preferencyjnie indukuje pobudzenie komórek T2 Th2. Patogeny ... [Read more...]

DevURL

Polecane:



Tags

bakteryjne zapalenie pochwy leki choroba dwubiegunowa przyczyny dieta paleo jadłospis na tydzień etnoliga football trening ile kcal ma bułka grahamka karpacz informacja turystyczna leclerc szczecin godziny otwarcia luxmed lublin odbiór wyników makabi makabi warszawa najlepszy prezent dla kobiety nietrzymanie moczu zabieg proces pielęgnowania pacjenta z nadciśnieniem tętniczym program promocji zdrowia rezonans magnetyczny otwarty warszawa rezonans magnetyczny przeciwwskazania stargard szczeciński szpital szczepienie dur brzuszny szpital lublin jaczewskiego tomografia komputerowa cennik witaminy dla nastolatków

Copyright © 2021 Klinika makabi warszawa.