Klinika makabi warszawa

Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu

2 września 2019 by admin

Pominięcie eksonu wykorzystuje antysensowne oligonukleotydy jako leczenie chorób genetycznych. Antysensowne oligonukleotydy stosowane do pomijania egzonu są zaprojektowane do ominięcia przedwczesnych kodonów stop w docelowym RNA i przywrócenia przerwania ramki odczytu. Pomijanie egzonu jest obecnie testowane na ludziach z mutacjami genu dystrofiny, którzy mają dystrofię mięśni Duchenne a. W przypadku dystrofii mięśniowej Duchenne a uzasadnienie pominięcia egzonu pochodzi z obserwacji u pacjentów z naturalnie występującymi mutacjami genu dystrofiny, które wytworzyły wewnętrznie usunięte, ale częściowo funkcjonalne białka dystrofiny. Obecnie rozszerzyliśmy możliwości pominięcia egzonu poprzez sprawdzenie, czy wewnętrzne, w ramce skrócenie białka a-markera transbłonowego jest funkcjonalne. Wytworzyliśmy wewnętrznie skrócone białko .-sarkoglikanu, które nazwaliśmy Mini-Gamma poprzez usunięcie dużej części zewnątrzkomórkowej domeny. Mini-Gamma dostarczyła funkcjonalnych i patologicznych korzyści, aby skorygować utratę (3-sarkoglikanu w modelu Drosophila, w badaniach ekspresji heterologicznych komórek oraz w myszach transgenicznych pozbawionych a-markaroglikanu. Stworzyliśmy komórkowy model choroby mięśni ludzkich i wykazaliśmy, że wiele pomijanych eksonów może być indukowanych w RNA kodującym zmutowany ludzki a-markaroglikan. Ponieważ Mini-Gamma reprezentuje usunięcie 4 z 7 kodujących egzonów w a-sarkoglikan, to podejście zapewnia skuteczną strategię leczenia większości pacjentów z mutacjami genów P-sarkoglikanu. Wprowadzenie Mutacje, które zaburzają kompleks glikoproteiny dystrofiny (DGC), powodują dystrofię mięśniową (1. 3). Dystrofina i związane z nią białka lokalizują się w błonie komórkowej mięśni, działając jako łącznik między wewnątrzkomórkowym cytoszkieletem a matrycą pozakomórkową (4, 5). Duże delecje w genie dystrofiny odpowiadają za dystrofię mięśniową Duchenne a (DMD). Mutacje, które powodują wewnętrzne delecje i utrzymują ramę odczytu dystrofiny powodują łagodniejszą dystrofię mięśniową Beckera (BMD). Te obserwacje w BMD stanowiły podstawę do opracowania terapii antysensownym oligonukleotydem (AON) do leczenia DMD w celu indukowania zdarzeń pominięcia eksonu w celu przywrócenia ramki odczytu. Pomijanie eksonu DMD, według projektu, generuje wewnętrznie skrócone i częściowo funkcjonalne białko. Klinicznie przewiduje się, że pomijanie eksonu będzie przekształcać ciężkich pacjentów z DMD w łagodniejszych pacjentów z BMD, co doprowadzi do przedłużonego chodzenia i lepszego utrzymania siły mięśni. Próby kliniczne, które testują pomijanie eks w DMD postępują (6. 10). Dystrofina, z jej wysoce powtarzalną wewnętrzną strukturą złożoną z 24 powtórzeń spektralnych, jest idealna do pominięcia egzonu. Ponadto, ponieważ gen kodujący dystrofinę znajduje się na chromosomie X, AON potrzebują jedynie celu mRNA wytwarzanego z allelu. Subcompleks sarkoglikanu w DGC składa się z 4 jednojądrzowych podjednostek transbłonowych: a-, a-, a- i a-sarkoglikanu (11, 12). Recesywne mutacje powodujące utratę funkcji w genach kodujących a-, a-, a- i a-sarkoglikan powodują, odpowiednio, dystrofie mięśni kończyn dolnych (LGMD), odpowiednio, 2D, 2E, 2C i 2F (13-16). W tym miejscu zbadaliśmy prawdopodobieństwo zastosowania strategii pomijania eksonów w leczeniu pacjentów LGMD 2C z mutacjami w SGCG, genie kodującym a-markaroglikan. Najpowszechniejszą mutacją u pacjentów LGMD 2C jest delecja tyminy z łańcucha 5 tymin nukleotydowych zasad 521-525 w eksonie 6 genu a-sarkoglikanu, określana jako 521-P (15). Ta mutacja przesuwa ramkę odczytu i skutkuje brakiem białka a-sarkoglikanu i wtórnej redukcji a- i a-sarkoglikanów (15). Pominięcie tej mutacji i przywrócenie ramki odczytu wymaga pominięcia eksonów 4, 5, 6 i 7. To wewnętrznie skrócone białko, które określamy jako Mini-Gamma, zachowuje wewnątrzkomórkowy, transbłonowy i skrajny koniec karboksylowy. Aby ocenić zdolność Mini-Gammy do zastąpienia pełnowymiarowego a-markaroglikanu, wygenerowaliśmy zarówno transgeniczne muchy, jak i myszy eksprymujące Mini-Gamma, znajdując funkcjonalne i molekularne dowody w celu ratowania niedoboru P-sarkoglikanu. Dostarczamy również dowodów potwierdzających, że pominięcie egzonu można indukować w zmutowanych komórkach ludzkich SGCG. Wyniki Ekspresja mysiej Mini-Gamma ratuje model dystrofii mięśniowej Drosophila. A-Sarkoglikan jest białkiem transbłonowym typu II o krótkiej domenie wewnątrzkomórkowej, pojedynczym pasie transbłonowym i większej zewnątrzkomórkowej domenie na końcu karboksylowym. Transgen został zaprojektowany do ekspresji wewnętrznie obciętego a-sarkoglikanu. Wewnętrznie skrócone białko, określane jako Mini-Gamma, odzwierciedla delecję regionów białkowych kodowanych przez eksony 4, 5, 6 i 7 (Figura 1A)
[więcej w: bakteryjne zapalenie pochwy leki, ile kcal ma bułka grahamka, nietrzymanie moczu zabieg ]
[hasła pokrewne: najlepszy prezent dla kobiety, ile kcal ma bułka grahamka, luxmed lublin odbiór wyników ]

Posted in: Bez kategorii Tagged: ile kcal ma bułka grahamka, luxmed lublin odbiór wyników, najlepszy prezent dla kobiety

Partnerzy serwisu:

Męskie hobby

Zobacz tez:

Przebudowa białka transmembranowego w leczeniu dystrofii mięśniowej z pominięciem eksonu ad

Aby przetestować funkcjonalność Mini-Gamma, wykorzystano system GAL4 / UAS do ekspresji mysiego Mini-Gamma w uprzednio ustalonym modelu dystrofii mięśniowej Drosophila (17, 18). Drosophila ma pojedynczy (3 / a-sarkoglikanowy ortolog, który jest równie powiązany z s-ai-sarkoglikanem (35% identyczny, 56% podobny do każdego). Muchy Sgcd840 mają dużą delecję genu Sgcd Drosophila, a muchy Sgcd840 rozwijają upośledzoną ruchliwość ... [Read more...]

CX3CR1 reguluje homeostazę makrofagów jelitowych, translokację bakteryjną i odpowiedzi kolektywne Th17 u myszy czesc 4

Wykazano, że makrofagi LP są ważnymi regulatorami odpowiedzi immunologicznej podczas zapalenia jelita. Dlatego specyficzna redukcja makrofagów LP w niedoborze CX3CR1 skłoniła nas do przeanalizowania, w jaki sposób myszy reagują na ostre zapalenie okrężnicy wywołane przez DSS. Rozpoczynając już 2 dni po podaniu DSS, Cx3cr1gfp / gfp i Cx3cr1. /. myszy wykazywały znacząco nasilone objawy choroby ... [Read more...]

Mechanizm i profilaktyka ostrego uszkodzenia nerek u nefropatii w modelu gryzonia ad 7

Domeny VL z 20 unikalnych FLC indywidualnie sklonowano w pGADT7 do stosowania w eksperymentach drożdżowych 2-hybrydowych. Saccharomyces cerevisiae, AH 109, również kotransformowano z plazmidami, które służyły jako kontrole eksperymentalne pozytywne (pGBKT7-53 / pGADT7-T) lub negatywne (pGBKT7-Lam / pB42AD-T). pGBKT7-53 i pGADT7-T dostarczyły pozytywny eksperyment kontrolny przez kodowanie białek o znanej interakcji (mysiego antygenu T dużego ... [Read more...]

DevURL

Polecane:

siłownie dla niepełnosprawnych
https://vigor-point.pl/
lasocki zwrot

Tags

bakteryjne zapalenie pochwy leki choroba dwubiegunowa przyczyny dieta paleo jadłospis na tydzień etnoliga football trening ile kcal ma bułka grahamka karpacz informacja turystyczna leclerc szczecin godziny otwarcia luxmed lublin odbiór wyników makabi makabi warszawa najlepszy prezent dla kobiety nietrzymanie moczu zabieg proces pielęgnowania pacjenta z nadciśnieniem tętniczym program promocji zdrowia rezonans magnetyczny otwarty warszawa rezonans magnetyczny przeciwwskazania stargard szczeciński szpital szczepienie dur brzuszny szpital lublin jaczewskiego tomografia komputerowa cennik witaminy dla nastolatków

Copyright © 2021 Klinika makabi warszawa.