Temperaturę utrzymywano na poziomie 37 ° C. Zmieszanie roztworu i pH regulowano przez przepuszczanie w komorach nasyconego wodą 95% O2 ~ 5% CO2. Elektrody napięciowe i prądowe to elektrody Ag / AgCl z mikroporowatymi ceramicznymi końcówkami. Typowe eksperymenty składały się z następującej procedury. Na początku każdego eksperymentu określano oporność płynu i potencjały elektrodowe dla filtrów zerowych w buforze A (120 mM NaCl, 10 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM KCl, 10 mM NaHCO3, 1,2 mM CaCl2, mM MgSO4) (19 ) i odejmowane od kolejnych pomiarów. Następnie określono potencjały elektryczne, gdy bufor B (60 mM NaCl, 120 mM mannitol, 10 mM HEPES, pH 7,4, 5 mM KCl, 10 mM NaHCO3, 1,2 mM CaCl2, mM MgSO4) zastąpił bufor A po stronie wierzchołkowej lub podstawy pustych filtrów. Współczynniki rozcieńczenia zmierzone przy użyciu filtrów zerowych odjęto od potencjałów rozcieńczonych kontrolnymi lub indukowanymi komórkami MDCK. Po początkowych pomiarach z zastosowaniem filtrów zerowych, filtry usunięto i zastąpiono filtrami zawierającymi konfluentne monowarstwy komórek MDCK. Filtry natychmiast przemyto dwukrotnie na powierzchniach szczytowych i szczytowych buforem A w 37 ° C. TER lub przewodnictwo całkowite (GT; / TER × 1000) zmierzono za pomocą odchylenia napięcia, gdy powtarzalne impulsy prądu 40-
